അഗറോസ് ജെൽ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസിൻ്റെ അടിസ്ഥാന സാങ്കേതിക വിദ്യകൾ(1)

1. വർഗ്ഗീകരണം

ജെൽ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് ലംബ തരങ്ങളായി തിരിച്ചിരിക്കുന്നു (കോളം ജെല്ലുകളും സ്ലാബ് ജെല്ലുകളും ഉൾപ്പെടെ), തിരശ്ചീന തരങ്ങൾ (പ്രധാനമായും സ്ലാബ് ജെൽസ്) (ചിത്രം 6-18). സാധാരണയായി, ലംബമായ വേർതിരിവ് തിരശ്ചീനത്തേക്കാൾ അൽപ്പം ഉയർന്നതാണ്, എന്നാൽ തിരശ്ചീനമായ ജെൽ തയ്യാറാക്കലിന് കുറഞ്ഞത് നാല് ഗുണങ്ങളുണ്ട്: മുഴുവൻ ജെല്ലിന് താഴെയും പിന്തുണയുണ്ട്, ഇത് കുറഞ്ഞ സാന്ദ്രതയുള്ള അഗറോസിൻ്റെ ഉപയോഗം അനുവദിക്കുന്നു; വ്യത്യസ്ത സവിശേഷതകളുള്ള അഗറോസ് ജെൽ പ്ലേറ്റുകൾ തയ്യാറാക്കാൻ കഴിയും; ജെൽ തയ്യാറാക്കലും സാമ്പിൾ ലോഡിംഗും കൂടുതൽ സൗകര്യപ്രദമാണ്; ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് ചേമ്പർ നിർമ്മിക്കാൻ എളുപ്പവും ചെലവ് കുറഞ്ഞതുമാണ്. ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് ബഫറിൻ്റെ ഉപരിതലത്തിൽ നിന്ന് ഏകദേശം 1 മില്ലീമീറ്ററോളം താഴെയായി അഗറോസ് ജെൽ പ്ലേറ്റ് ഉപയോഗിച്ച് തിരശ്ചീന ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് നടത്തുന്നതിനാൽ, ഇതിനെ സബ്‌മെർജ്ഡ് ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് എന്നും വിളിക്കുന്നു.

图片2

അഗറോസ് ജെൽ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസിനുള്ള ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് ടാങ്ക് DYCP-31DN

2.ബഫർ സിസ്റ്റം

ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് വേർതിരിവിൽ, മിക്ക സിസ്റ്റങ്ങളും തുടർച്ചയായ സംവിധാനങ്ങൾ സ്വീകരിക്കുന്നു. സാധാരണയായി ഉപയോഗിക്കുന്ന ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് ബഫറുകളിൽ TBE (0.08mol/L Tris·HCl, pH 8.5, 0.08mol/L ബോറിക് ആസിഡ്, 0.0024mol/L EDTA) ബഫർ, THE (0.04mol/L Tris·HCl, pH 7.8, 0.02mol/L/L/L സോഡിയം അസറ്റേറ്റ്, 0.0018mol/L EDTA) ബഫർ. ഈ ബഫറുകൾ സാധാരണയായി 10x സ്റ്റോക്ക് സൊല്യൂഷനുകളായി തയ്യാറാക്കുകയും ഉപയോഗിക്കുമ്പോൾ ആവശ്യമായ സാന്ദ്രതയിലേക്ക് ലയിപ്പിക്കുകയും ചെയ്യുന്നു. അഗറോസ് ജെല്ലിലെ രേഖീയവും വൃത്താകൃതിയിലുള്ളതുമായ ഡിഎൻഎയുടെ മൈഗ്രേഷൻ നിരക്ക് ഉപയോഗിക്കുന്ന ബഫറിനനുസരിച്ച് വ്യത്യാസപ്പെടുന്നു. ബഫറിൽ, ലീനിയർ ഡിഎൻഎയുടെ മൈഗ്രേഷൻ നിരക്ക് വൃത്താകൃതിയിലുള്ള ഡിഎൻഎയേക്കാൾ കൂടുതലാണ്, അതേസമയം ടിബിഇ ബഫറിൽ വിപരീതമാണ് ശരി.

3

3.അഗറോസ് ജെൽ തയ്യാറാക്കൽ

(1) തിരശ്ചീന അഗറോസ് ജെൽ തയ്യാറാക്കൽ

(എ) 1x ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് ബഫർ ഉപയോഗിച്ച് അഗറോസ് ജെലിൻ്റെ ആവശ്യമായ സാന്ദ്രത തയ്യാറാക്കുക.

(ബി) ചുട്ടുതിളക്കുന്ന വാട്ടർ ബാത്തിലോ മാഗ്നെറ്റിക് സ്റ്റിററിലോ മൈക്രോവേവിലോ അഗറോസ് പൂർണ്ണമായും അലിഞ്ഞുപോകാൻ ചൂടാക്കുക. അഗറോസ് ലായനി 55 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിലേക്ക് തണുപ്പിക്കുക, 0.5 μg/ml എന്ന അന്തിമ സാന്ദ്രതയിലേക്ക് എത്തിഡിയം ബ്രോമൈഡ് (EB) ഡൈ ചേർക്കുക.

(സി) ചെറിയ അളവിലുള്ള അഗറോസ് ജെൽ ഉപയോഗിച്ച് ഗ്ലാസിൻ്റെയോ അക്രിലിക് പ്ലേറ്റുകളുടെയോ അരികുകൾ അടയ്ക്കുക, ഒരു ചീപ്പ് ചേർക്കുക, ചീപ്പ് പല്ലുകൾ പ്ലേറ്റിന് മുകളിൽ 0.5~1.0 മില്ലിമീറ്റർ ഉയരത്തിൽ വയ്ക്കുക.

(d) ഉരുകിയ അഗറോസ് ജെൽ ലായനി ഗ്ലാസിലേക്കോ അക്രിലിക് പ്ലേറ്റിലേക്കോ തുടർച്ചയായി ഒഴിക്കുക (കനം DNA സാമ്പിളിൻ്റെ അളവിനെ ആശ്രയിച്ചിരിക്കുന്നു), വായു കുമിളകളുടെ ആമുഖം ഒഴിവാക്കുക. ഊഷ്മാവിൽ ഇത് സ്വാഭാവികമായി ഉറപ്പിക്കട്ടെ.

(ഇ) പൂർണ്ണമായ ദൃഢീകരണത്തിന് ശേഷം ചീപ്പ് ശ്രദ്ധാപൂർവ്വം നീക്കം ചെയ്യുക. ജെൽ ടാങ്കിലേക്ക് ഉചിതമായ അളവിൽ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് ബഫർ ചേർക്കുക, ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് ബഫറിൻ്റെ ഉപരിതലത്തിൽ നിന്ന് ഏകദേശം 1 മില്ലീമീറ്ററോളം ജെൽ പ്ലേറ്റ് മുങ്ങിക്കിടക്കുന്നുണ്ടെന്ന് ഉറപ്പാക്കുക.

(2) വെർട്ടിക്കൽ അഗറോസ് ജെൽ തയ്യാറാക്കൽ

(എ) എത്തനോൾ ഉപയോഗിച്ച് കഴുകി ഗ്ലാസ് പ്ലേറ്റുകളിൽ നിന്ന് ഗ്രീസ് അല്ലെങ്കിൽ അവശിഷ്ടങ്ങൾ നീക്കം ചെയ്യുക.

(ബി) മുന്നിലും പിന്നിലും അണക്കെട്ടുകൾക്കിടയിൽ സ്‌പെയ്‌സർ പ്ലേറ്റുകൾ സ്ഥാപിക്കുക, സ്‌പെയ്‌സർ പ്ലേറ്റുകളുടെ അരികുകൾ മുന്നിലും പിന്നിലും അണക്കെട്ടുകളുമായി വിന്യസിക്കുക, ക്ലാമ്പുകൾ ഉപയോഗിച്ച് അവയെ സുരക്ഷിതമാക്കുക.

(സി) ജെൽ കാസ്റ്റിംഗ് ചേമ്പറിൻ്റെ അടിയിൽ 1 സെ.മീ ഉയരമുള്ള അഗറോസ് പ്ലഗ് രൂപപ്പെടുത്തുന്നതിന് സ്‌പെയ്‌സർ പ്ലേറ്റുകളുടെ അരികുകൾക്കിടയിൽ 1x ബഫറിൽ 2% അഗറോസ് ചേർക്കുക.

(d) 1x ബഫറിൽ തയ്യാറാക്കിയ, ആവശ്യമുള്ള സാന്ദ്രതയിൽ ഉരുകിയ അഗറോസ് ജെൽ മുകളിൽ നിന്ന് 1 സെൻ്റിമീറ്റർ വരെ താഴെയുള്ള ജെൽ ചേമ്പറിലേക്ക് ഒഴിക്കുക.

(ഇ) ചീപ്പ് പല്ലുകൾക്കടിയിൽ വായു കുമിളകൾ കുടുങ്ങുന്നത് ഒഴിവാക്കുക. ചിലപ്പോൾ, അഗറോസ് ജെൽ തണുപ്പിക്കുമ്പോൾ ചീപ്പ് പല്ലുകളിൽ ചുളിവുകൾ പ്രത്യക്ഷപ്പെടാം; അത്തരം സന്ദർഭങ്ങളിൽ, അതിനെ ദൃഢമാക്കുന്നതിന് മുകളിൽ കുറച്ച് ഉരുക്കിയ അഗറോസ് ചേർക്കുക.

(എഫ്) ചീപ്പ് നീക്കം ചെയ്യുക. ലോഡിംഗ് സ്ലോട്ടിലെ ബഫർ ചോർച്ച തടയാൻ, അഗറോസ് ജെൽ പ്ലേറ്റും ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് ചേമ്പറും തമ്മിലുള്ള ബന്ധം 2% അഗറോസ് ഉപയോഗിച്ച് അടച്ച് ആവശ്യമായ ബഫർ ചേർക്കുക.

(g) ജെൽ ചേമ്പറിലേക്ക് 1x ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് ബഫർ ചേർക്കുക.

(h) ബഫറിന് താഴെയുള്ള അഗറോസ് ജെല്ലിലേക്ക് ഡിഎൻഎ സാമ്പിളുകൾ ശ്രദ്ധാപൂർവ്വം ലോഡ് ചെയ്യുക.

3

അഗറോസ് ജെൽ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസിനെക്കുറിച്ചുള്ള അടിസ്ഥാന അറിവിനെക്കുറിച്ചുള്ള കൂടുതൽ വിവരങ്ങൾ, ഞങ്ങൾ അടുത്ത ആഴ്ച പങ്കിടും. ഈ വിവരങ്ങൾ നിങ്ങളുടെ പരീക്ഷണത്തിന് സഹായകരമാകട്ടെ എന്ന് ആശംസിക്കുന്നു.

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) 50 വർഷത്തിലേറെയായി ഞങ്ങളുടെ സ്വന്തം പ്രൊഫഷണൽ ടെക്നിക്കൽ ടീമും R&D സെൻ്ററും ഉപയോഗിച്ച് ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് ഉപകരണങ്ങൾ നിർമ്മിക്കുന്നതിൽ വൈദഗ്ദ്ധ്യം നേടിയിട്ടുണ്ട്. ഡിസൈൻ മുതൽ പരിശോധന വരെയുള്ള വിശ്വസനീയവും സമ്പൂർണ്ണവുമായ പ്രൊഡക്ഷൻ ലൈനും വെയർഹൗസും അതുപോലെ മാർക്കറ്റിംഗ് പിന്തുണയും ഞങ്ങൾക്കുണ്ട്. ഇലക്‌ട്രോഫോറെസിസ് സെൽ (ടാങ്ക്/ചേംബർ), ഇലക്‌ട്രോഫോറെസിസ് പവർ സപ്ലൈ, ബ്ലൂ എൽഇഡി ട്രാൻസിലുമിനേറ്റർ, യുവി ട്രാൻസിലുമിനേറ്റർ, ജെൽ ഇമേജ് & അനാലിസിസ് സിസ്റ്റം തുടങ്ങിയവയാണ് ഞങ്ങളുടെ പ്രധാന ഉൽപ്പന്നങ്ങൾ.

ഞങ്ങൾ ഇപ്പോൾ പങ്കാളികളെ തിരയുകയാണ്, OEM ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് ടാങ്കും വിതരണക്കാരും സ്വാഗതം ചെയ്യുന്നു.

ഞങ്ങളുടെ ഉൽപ്പന്നങ്ങൾക്കായി നിങ്ങൾക്ക് എന്തെങ്കിലും വാങ്ങൽ പ്ലാൻ ഉണ്ടെങ്കിൽ, ഞങ്ങളെ ബന്ധപ്പെടാൻ മടിക്കരുത്. നിങ്ങൾക്ക് ഇമെയിൽ വഴി ഞങ്ങൾക്ക് സന്ദേശം അയക്കാം[ഇമെയിൽ പരിരക്ഷിതം]അല്ലെങ്കിൽ[ഇമെയിൽ പരിരക്ഷിതം], അല്ലെങ്കിൽ ദയവായി ഞങ്ങളെ +86 15810650221 എന്ന നമ്പറിൽ വിളിക്കുക അല്ലെങ്കിൽ Whatsapp +86 15810650221 ചേർക്കുക, അല്ലെങ്കിൽ Wechat: 15810650221.

Whatsapp അല്ലെങ്കിൽ WeChat-ൽ ചേർക്കാൻ QR കോഡ് സ്കാൻ ചെയ്യുക.

2


പോസ്റ്റ് സമയം: ഡിസംബർ-07-2023