ഡിഎൻഎ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് സാധാരണ പ്രശ്നങ്ങൾ

ഡിഎൻഎയുടെ വിശകലനത്തിനായി മോളിക്യുലാർ ബയോളജിയിൽ ഉപയോഗിക്കുന്ന പ്രധാന രീതികളിൽ ഒന്നാണ് ജെൽ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ്. ഈ രീതിയിൽ ഡിഎൻഎയുടെ ശകലങ്ങൾ ഒരു ജെൽ മുഖേന മൈഗ്രേഷൻ ചെയ്യുന്നതാണ്, അവിടെ അവയെ വലിപ്പമോ രൂപമോ അടിസ്ഥാനമാക്കി വേർതിരിക്കുന്നു. എന്നിരുന്നാലും, നിങ്ങളുടെ ഇലക്‌ട്രോഫോറെസിസ് പരീക്ഷണങ്ങളിൽ എപ്പോഴെങ്കിലും അഗറോസ് ജെല്ലിൽ സ്‌മിയർ ചെയ്ത ബാൻഡുകളോ ജെല്ലിൽ ബാൻഡുകളോ പോലുള്ള എന്തെങ്കിലും പിശകുകൾ നിങ്ങൾ നേരിട്ടിട്ടുണ്ടോ? ഈ പിശകുകളുടെ കാരണം എന്തായിരിക്കാം?

നിങ്ങളുടെ റഫറൻസിനായി ഞങ്ങളുടെ സാങ്കേതിക വിദഗ്ദർ ഇവിടെ ട്രബിൾഷൂട്ടിംഗിൻ്റെ ജോഡികൾ സംഗ്രഹിച്ചിരിക്കുന്നു.

1. അഗറോസ് ജെല്ലിൽ പുരട്ടിയ ബാൻഡുകൾ

●ഡിഎൻഎ തകരാറിലായി. ന്യൂക്ലീസ് മലിനീകരണം ഒഴിവാക്കുക.

● ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് ബഫർ പുതിയതല്ല. ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് ബഫറിൻ്റെ ആവർത്തിച്ചുള്ള ഉപയോഗത്തിന് ശേഷം, അയോണിക് ശക്തി കുറയുന്നു, അതിൻ്റെ പിഎച്ച് മൂല്യം വർദ്ധിക്കുന്നു, അതിനാൽ ബഫർ ശേഷി ദുർബലമാകുന്നു, ഇത് ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് ഫലത്തെ ബാധിക്കുന്നു. ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് ബഫർ ഇടയ്ക്കിടെ മാറ്റിസ്ഥാപിക്കാൻ ശുപാർശ ചെയ്യുന്നു.

● തെറ്റായ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് അവസ്ഥകൾ ഉപയോഗിച്ചു. വോൾട്ടേജ് 20 V/cm കവിയാൻ അനുവദിക്കരുത്, ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് സമയത്ത് താപനില <30 ° C നിലനിർത്തുക. ഭീമാകാരമായ DNA സ്ട്രാൻഡ് ഇലക്ട്രോഫോറെസിസിന്, താപനില <15° C ആയിരിക്കണം. ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് ബഫറിന് മതിയായ ബഫർ ശേഷിയുണ്ടോയെന്ന് പരിശോധിക്കുക.

● ജെല്ലിൽ വളരെയധികം ഡിഎൻഎ ലോഡ് ചെയ്യപ്പെട്ടു. ഡിഎൻഎയുടെ അളവ് കുറയ്ക്കുക.

● ഡിഎൻഎയിൽ വളരെയധികം ഉപ്പ്. അധിക ലവണങ്ങൾ നീക്കം ചെയ്യാൻ എത്തനോൾ മഴ ഉപയോഗിക്കുക.

● ഡിഎൻഎയിൽ പ്രോട്ടീൻ കലർന്നിരുന്നു. പ്രോട്ടീൻ നീക്കം ചെയ്യാൻ ഫിനോൾ എക്സ്ട്രാക്ഷൻ ഉപയോഗിക്കുക.

● ഡിഎൻഎ ഡിനേച്ചർ ചെയ്തു. ഇലക്ട്രോഫോറെസിസിന് മുമ്പ് ചൂടാക്കരുത്. 20 mM NaCl ഉള്ള ബഫറിൽ DNA നേർപ്പിക്കുക.

2. അപാകതകൾ DNA ബാൻഡ് മൈഗ്രേഷൻ

● λHind III ശകലത്തിൻ്റെ COS സൈറ്റിൻ്റെ പുനർനിർമ്മാണം. ഇലക്‌ട്രോഫോറെസിസിന് മുമ്പ് ഡിഎൻഎ 65 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ 5 മിനിറ്റ് ചൂടാക്കുക, തുടർന്ന് ഐസ് യൂണിറ്റിൽ 5 മിനിറ്റ് തണുപ്പിക്കുക.

● തെറ്റായ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് അവസ്ഥകൾ ഉപയോഗിച്ചു. വോൾട്ടേജ് 20 V/cm കവിയാൻ അനുവദിക്കരുത്, ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് സമയത്ത് താപനില <30 ° C നിലനിർത്തുക. ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് ബഫറിന് മതിയായ ബഫർ ശേഷിയുണ്ടോയെന്ന് പരിശോധിക്കുക.

● ഡിഎൻഎ ഡിനേച്ചർ ചെയ്തു. ഇലക്ട്രോഫോറെസിസിന് മുമ്പ് ചൂടാക്കരുത്. 20 mM NaCl ഉള്ള ബഫറിൽ DNA നേർപ്പിക്കുക.

3. അഗറോസ് ജെല്ലിൽ ഡിഎൻഎ ബാൻഡുകൾ മങ്ങുകയോ ഇല്ലാതിരിക്കുകയോ ചെയ്യുക

● ജെല്ലിൽ ഡിഎൻഎയുടെ മതിയായ അളവോ സാന്ദ്രതയോ ഇല്ലായിരുന്നു. ഡിഎൻഎയുടെ അളവ് കൂട്ടുക. പോളിഅക്രിലാമൈഡ് ജെൽ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് അഗറോസ് ഇലക്ട്രോഫോറെസിസിനേക്കാൾ അൽപ്പം കൂടുതൽ സെൻസിറ്റീവ് ആണ്, സാമ്പിൾ ലോഡിംഗ് ഉചിതമായി കുറയ്ക്കാം.

● ഡി.എൻ.എ. ന്യൂക്ലീസ് മലിനീകരണം ഒഴിവാക്കുക.

● ഡിഎൻഎ ജെല്ലിൽ നിന്ന് ഇലക്ട്രോഫോറെസ് ചെയ്തു. കുറഞ്ഞ സമയത്തേക്ക് ജെൽ ഇലക്ട്രോഫോറീസ് ചെയ്യുക, കുറഞ്ഞ വോൾട്ടേജ് ഉപയോഗിക്കുക അല്ലെങ്കിൽ ഉയർന്ന ശതമാനം ജെൽ ഉപയോഗിക്കുക.

● എഥിഡിയം ബ്രോമൈഡ് കലർന്ന ഡിഎൻഎയുടെ ദൃശ്യവൽക്കരണത്തിനായി തെറ്റായ W പ്രകാശ സ്രോതസ്സ് ഉപയോഗിച്ചു. കൂടുതൽ സെൻസിറ്റിവിറ്റിക്കായി ഹ്രസ്വ തരംഗദൈർഘ്യം (254 nm) W ലൈറ്റ് ഉപയോഗിക്കുക.

4. DNA ബാൻഡുകൾ കാണുന്നില്ല

●ചെറിയ വലിപ്പമുള്ള ഡിഎൻഎ ജെല്ലിൽ നിന്ന് ഇലക്ട്രോഫോറെസ് ചെയ്തു. കുറഞ്ഞ സമയത്തേക്ക് ജെൽ ഇലക്ട്രോഫോറീസ് ചെയ്യുക, കുറഞ്ഞ വോൾട്ടേജ് ഉപയോഗിക്കുക അല്ലെങ്കിൽ ഉയർന്ന ശതമാനം ജെൽ ഉപയോഗിക്കുക.

● സമാനമായ തന്മാത്രകളുടെ DNA ബാൻഡുകളെ വേർതിരിച്ചറിയാൻ പ്രയാസമാണ്. ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് സമയം വർദ്ധിപ്പിക്കുക, ഏകാഗ്രത പരിശോധിക്കുകജെല്ലിൻ്റെ ശതമാനം ജെൽ ശരിയായി ഉപയോഗിക്കണമെന്ന് ഉറപ്പാക്കാൻ.

● ഡിഎൻഎ ഡിനേച്ചർ ചെയ്തു. ഇലക്ട്രോഫോറെസിസിന് മുമ്പ് ചൂടാക്കരുത്. 20 mM NaCl ഉള്ള ബഫറിൽ DNA നേർപ്പിക്കുക.

● ഡിഎൻഎ സ്ട്രോണ്ടുകൾ വളരെ വലുതാണ്, കൂടാതെ പരമ്പരാഗത ജെൽ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് അനുയോജ്യമല്ല. പൾസ് ജെൽ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസിൽ വിശകലനം ചെയ്യുക.അഗറോസ് ജെൽ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസിൽ നിങ്ങൾക്ക് മറ്റ് എന്തെല്ലാം പ്രശ്നങ്ങൾ ഉണ്ടായിരുന്നു? ഭാവിയിൽ ഗൈഡുകൾക്കായി ഞങ്ങൾ കൂടുതൽ ഗവേഷണം നടത്തും.

ചൈനയിലെ ഇലക്‌ട്രോഫോറെസിസുമായി ബന്ധപ്പെട്ട ഉൽപ്പന്നങ്ങളിൽ ശ്രദ്ധ കേന്ദ്രീകരിക്കുന്ന ഒരു പ്രത്യേക കമ്പനിയാണ് ബെയ്ജിംഗ് ലിയുയി ബയോടെക്നോളജി കോ., ലിമിറ്റഡ് (ലിയുയി ബയോടെക്). അതിൻ്റെ കഥ ആരംഭിക്കുന്നത് 1970-ൽ ചൈന ഇതുവരെ പരിഷ്കരണത്തിലേക്കും തുറന്ന സമയത്തിലേക്കും പ്രവേശിച്ചിട്ടില്ലായിരുന്നു. വർഷങ്ങളുടെ വികസനത്തിലൂടെ, Liuyi Bitotech-ൻ്റെ സ്വന്തം ബ്രാൻഡ് ഉണ്ട്, അത് ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് ഉൽപ്പന്നങ്ങളുടെ ആഭ്യന്തര വിപണിയിൽ Liuyi ബ്രാൻഡ് എന്നറിയപ്പെടുന്നു.

Liuyi ബ്രാൻഡിന് ചൈനയിൽ 50 വർഷത്തിലധികം ചരിത്രമുണ്ട്, കൂടാതെ കമ്പനിക്ക് ലോകമെമ്പാടും സുസ്ഥിരവും ഉയർന്ന നിലവാരമുള്ളതുമായ ഉൽപ്പന്നങ്ങൾ നൽകാൻ കഴിയും. വർഷങ്ങളുടെ വികസനത്തിലൂടെ, ഇത് നിങ്ങളുടെ തിരഞ്ഞെടുപ്പിന് യോഗ്യമാണ്!

ലിയുയി ബയോടെക്കിൻ്റെ തിരശ്ചീന ഇലക്‌ട്രോഫോറെസിസ് സെല്ലുകൾ (ടാങ്കുകൾ/ചേമ്പറുകൾ) നല്ല രൂപവും ഉയർന്ന നിലവാരവുമാണ്. വ്യത്യസ്ത വലുപ്പത്തിലുള്ള ജെൽ ട്രേകൾ ഉപയോഗിച്ച്, അവയ്ക്ക് നിങ്ങളുടെ വ്യത്യസ്ത പരീക്ഷണ ആവശ്യങ്ങൾ നിറവേറ്റാനാകും. ഞങ്ങൾക്ക് ഞങ്ങളുടെ സ്വന്തം സാങ്കേതിക ടീമും ഫാക്ടറിയും ഉണ്ട്. ഡിസൈൻ മുതൽ നിർമ്മാണം വരെ, അസംസ്കൃത വസ്തുക്കൾ പ്രധാന ഭാഗങ്ങൾ വരെ, മുഴുവൻ പ്രക്രിയയും നമുക്ക് നിയന്ത്രിക്കാനാകും. DYCP 31 സീരീസ് ഡിഎൻഎ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസിനുള്ളതാണ്, അവ മാതൃകയാണ്DYCP-31BN, DYCP-31CN,DYCP-31DN, ഒപ്പംDYCP-31E. അവയ്ക്കിടയിലുള്ള വ്യത്യാസങ്ങൾ ജെൽ വലുപ്പവും വിലയുമാണ്. ഞങ്ങളുടെ ഉപഭോക്താക്കൾക്കായി ഞങ്ങൾ പൂർണ്ണ വലുപ്പത്തിലുള്ള ഉൽപ്പന്നങ്ങൾ നൽകുന്നു. മോഡൽDYCP-32Cഏറ്റവും വലിയ ജെൽ 250mm*250mm ഉണ്ടാക്കാം.

അതേസമയം, ഞങ്ങളുടെ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് പവർ സപ്ലൈ ഞങ്ങൾ ശുപാർശ ചെയ്യുന്നുDYY-6C,DYY-6Dഒപ്പംDYY-10Cഞങ്ങളുടെ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് സെല്ലുകൾക്ക് (ടാങ്കുകൾ/ചേമ്പറുകൾ) DYCP-31, 32 സീരീസ്.

നിങ്ങൾക്ക് ഉൽപ്പന്നങ്ങളെ കുറിച്ച് കൂടുതൽ വിവരങ്ങൾ വേണമെങ്കിൽ, കൂടുതൽ ലഭിക്കുന്നതിന് ദയവായി ഈ വെബ്സൈറ്റ് സന്ദർശിക്കുക, നിങ്ങൾക്ക് എന്താണ് വേണ്ടതെന്ന് ഞങ്ങളെ അറിയിക്കുന്നതിന് ഇമെയിൽ വഴി ഞങ്ങളെ ബന്ധപ്പെടാൻ സ്വാഗതം, ഞങ്ങൾ നിങ്ങൾക്ക് പരിഹാരങ്ങൾ നൽകാൻ കഴിയുമോ എന്ന് നോക്കുക.

ഞങ്ങളെക്കുറിച്ചുള്ള കൂടുതൽ വിവരങ്ങൾക്ക്, ഇമെയിൽ വഴി ഞങ്ങളെ ബന്ധപ്പെടുക[ഇമെയിൽ പരിരക്ഷിതം], [ഇമെയിൽ പരിരക്ഷിതം].