പോളിഅക്രിലാമൈഡ് ജെൽ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ്
ജെൽ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് എന്നത് ഡിഎൻഎ, ആർഎൻഎ, പ്രോട്ടീനുകൾ തുടങ്ങിയ സ്ഥൂലതന്മാത്രകളെ വേർപെടുത്താൻ അനുവദിക്കുന്ന, ജൈവശാഖകളിലുടനീളമുള്ള ലബോറട്ടറികളിലെ ഒരു അടിസ്ഥാന സാങ്കേതികതയാണ്. വ്യത്യസ്ത വേർതിരിക്കൽ മാധ്യമങ്ങളും മെക്കാനിസങ്ങളും ഈ തന്മാത്രകളുടെ ഉപവിഭാഗങ്ങളെ അവയുടെ ഭൗതിക സവിശേഷതകൾ ചൂഷണം ചെയ്ത് കൂടുതൽ ഫലപ്രദമായി വേർതിരിക്കാൻ അനുവദിക്കുന്നു. പ്രത്യേകിച്ച് പ്രോട്ടീനുകൾക്ക്, പോളിഅക്രിലാമൈഡ് ജെൽ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് (PAGE) പലപ്പോഴും തിരഞ്ഞെടുക്കാനുള്ള സാങ്കേതികതയാണ്.
പ്രോട്ടീനുകൾ പോലുള്ള മാക്രോമോളിക്യൂളുകളെ അവയുടെ ഇലക്ട്രോഫോറെറ്റിക് മൊബിലിറ്റിയെ അടിസ്ഥാനമാക്കി വേർതിരിക്കുന്ന ഒരു സാങ്കേതികതയാണ് PAGE, അതായത്, വിപരീത ചാർജിൻ്റെ ഇലക്ട്രോഡിലേക്ക് നീങ്ങാനുള്ള വിശകലനങ്ങളുടെ കഴിവ്. PAGE-ൽ, തന്മാത്രയുടെ ചാർജ്, വലിപ്പം (തന്മാത്രാ ഭാരം), ആകൃതി എന്നിവ അനുസരിച്ചാണ് ഇത് നിർണ്ണയിക്കുന്നത്. പോളിഅക്രിലാമൈഡ് ജെല്ലിൽ രൂപംകൊണ്ട സുഷിരങ്ങളിലൂടെ അനലിറ്റുകൾ നീങ്ങുന്നു. ഡിഎൻഎ, ആർഎൻഎ എന്നിവയിൽ നിന്ന് വ്യത്യസ്തമായി, പ്രോട്ടീനുകൾ സംയോജിപ്പിച്ചിരിക്കുന്ന അമിനോ ആസിഡുകൾക്കനുസരിച്ച് ചാർജിൽ വ്യത്യാസപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു, അവ എങ്ങനെ പ്രവർത്തിക്കുന്നു എന്നതിനെ സ്വാധീനിക്കും. അമിനോ ആസിഡ് സ്ട്രിംഗുകൾ അവയുടെ പ്രത്യക്ഷമായ വലിപ്പത്തെയും തന്മൂലം സുഷിരങ്ങളിലൂടെ സഞ്ചരിക്കാൻ കഴിയുന്നതിനെയും ബാധിക്കുന്ന ദ്വിതീയ ഘടനകളും ഉണ്ടാക്കാം. അതിനാൽ, ഇലക്ട്രോഫോറെസിസിനു മുമ്പായി പ്രോട്ടീനുകളെ വ്യത്യസ്തമാക്കുന്നത്, വലിപ്പത്തിൻ്റെ കൂടുതൽ കൃത്യമായ കണക്ക് ആവശ്യമെങ്കിൽ അവയെ രേഖീയമാക്കുന്നത് ചിലപ്പോൾ അഭികാമ്യമായിരിക്കും.
SDS പേജ്
സോഡിയം-ഡോഡെസിൽ സൾഫേറ്റ് പോളിഅക്രിലാമൈഡ് ജെൽ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് 5 മുതൽ 250 kDa വരെ പിണ്ഡമുള്ള പ്രോട്ടീൻ തന്മാത്രകളെ വേർതിരിക്കുന്ന ഒരു സാങ്കേതികതയാണ്. പ്രോട്ടീനുകൾ അവയുടെ തന്മാത്രാ ഭാരത്തിൻ്റെ അടിസ്ഥാനത്തിൽ മാത്രമാണ് വേർതിരിക്കുന്നത്. പ്രോട്ടീൻ സാമ്പിളുകളുടെ അന്തർലീനമായ ചാർജുകൾ മറയ്ക്കുകയും അവയ്ക്ക് പിണ്ഡാനുപാതത്തിന് സമാനമായ ചാർജ് നൽകുകയും ചെയ്യുന്ന ജെല്ലുകളുടെ തയ്യാറെടുപ്പിൽ സോഡിയം ഡോഡെസിൽ സൾഫേറ്റ് എന്ന അയോണിക് സർഫക്റ്റൻ്റ് ചേർക്കുന്നു. ലളിതമായി പറഞ്ഞാൽ, ഇത് പ്രോട്ടീനുകളെ ഇല്ലാതാക്കുകയും അവയ്ക്ക് നെഗറ്റീവ് ചാർജ് നൽകുകയും ചെയ്യുന്നു.
നേറ്റീവ് പേജ്
പ്രോട്ടീനുകളെ വേർതിരിക്കുന്നതിന് ഡീനാറ്റർ ചെയ്യാത്ത ജെല്ലുകൾ ഉപയോഗിക്കുന്ന ഒരു സാങ്കേതികതയാണ് നേറ്റീവ് പേജ്. എസ്ഡിഎസ് പേജിൽ നിന്ന് വ്യത്യസ്തമായി, ജെല്ലുകൾ തയ്യാറാക്കുന്നതിൽ ഡിനാറ്ററിംഗ് ഏജൻ്റ് ചേർക്കുന്നില്ല. തൽഫലമായി, പ്രോട്ടീനുകളുടെ ചാർജിൻ്റെയും വലുപ്പത്തിൻ്റെയും അടിസ്ഥാനത്തിലാണ് പ്രോട്ടീനുകളുടെ വേർതിരിവ് നടക്കുന്നത്. ഈ സാങ്കേതികതയിൽ, പ്രോട്ടീനുകളുടെ അനുരൂപീകരണം, മടക്കിക്കളയൽ, അമിനോ ആസിഡ് ശൃംഖലകൾ എന്നിവ വേർപിരിയലിനെ ആശ്രയിച്ചിരിക്കുന്ന ഘടകങ്ങളാണ്. ഈ പ്രക്രിയയിൽ പ്രോട്ടീനുകൾക്ക് കേടുപാടുകൾ സംഭവിക്കുന്നില്ല, വേർപിരിയൽ പൂർത്തിയാക്കിയ ശേഷം വീണ്ടെടുക്കാൻ കഴിയും.
പോളിഅക്രിലാമൈഡ് ജെൽ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് (PAGE) എങ്ങനെയാണ് പ്രവർത്തിക്കുന്നത്?
PAGE-ൻ്റെ അടിസ്ഥാന തത്വം ഒരു വൈദ്യുത പ്രവാഹം ഉപയോഗിച്ച് പോളിഅക്രിലാമൈഡ് ജെല്ലിൻ്റെ സുഷിരങ്ങളിലൂടെ കടന്നുപോകുന്നതിലൂടെ വിശകലനങ്ങളെ വേർതിരിക്കുക എന്നതാണ്. ഇത് നേടുന്നതിന്, അമോണിയം പെർസൾഫേറ്റ് (എപിഎസ്) ചേർത്ത് ഒരു അക്രിലമൈഡ്-ബിസാക്രിലമൈഡ് മിശ്രിതം പോളിമറൈസ് ചെയ്യുന്നു (പോളിഅക്രിലമൈഡ്). tetramethylethylenediamine (TEMED) ഉത്തേജിപ്പിക്കപ്പെടുന്ന പ്രതികരണം, വിശകലനങ്ങൾക്ക് ചലിക്കാൻ കഴിയുന്ന സുഷിരങ്ങളുള്ള ഒരു വല പോലെയുള്ള ഘടന ഉണ്ടാക്കുന്നു (ചിത്രം 2). ജെല്ലിൽ ഉൾപ്പെടുത്തിയിട്ടുള്ള മൊത്തം അക്രിലാമൈഡിൻ്റെ ഉയർന്ന ശതമാനം, സുഷിരങ്ങളുടെ വലുപ്പം ചെറുതാണ്, അതിനാൽ കടന്നുപോകാൻ കഴിയുന്ന പ്രോട്ടീനുകൾ ചെറുതായിരിക്കും. അക്രിലാമൈഡിൻ്റെയും ബിസാക്രിലമൈഡിൻ്റെയും അനുപാതം സുഷിരത്തിൻ്റെ വലുപ്പത്തെയും ബാധിക്കും, പക്ഷേ ഇത് പലപ്പോഴും സ്ഥിരമായി നിലനിർത്തുന്നു. ചെറിയ സുഷിരങ്ങളുടെ വലിപ്പം ചെറിയ പ്രോട്ടീനുകൾക്ക് ജെല്ലിലൂടെ സഞ്ചരിക്കാൻ കഴിയുന്ന വേഗത കുറയ്ക്കുകയും അവയുടെ റെസല്യൂഷൻ മെച്ചപ്പെടുത്തുകയും കറൻ്റ് പ്രയോഗിക്കുമ്പോൾ വേഗത്തിൽ ബഫറിലേക്ക് ഓടുന്നത് തടയുകയും ചെയ്യുന്നു.
പോളിഅക്രിലാമൈഡ് ജെൽ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസിനുള്ള ഉപകരണങ്ങൾ
ജെൽ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് സെൽ (ടാങ്ക്/ചേംബർ)
പോളിഅക്രിലാമൈഡ് ജെൽ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസിനുള്ള (PAGE) ജെൽ ടാങ്ക് അഗറോസ് ജെൽ ടാങ്കിൽ നിന്ന് വ്യത്യസ്തമാണ്. അഗറോസ് ജെൽ ടാങ്ക് തിരശ്ചീനമാണ്, അതേസമയം PAGE ടാങ്ക് ലംബമാണ്. വെർട്ടിക്കൽ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് സെൽ (ടാങ്ക്/ചേംബർ) ഉപയോഗിച്ച്, രണ്ട് ഗ്ലാസ് പ്ലേറ്റുകൾക്കിടയിൽ ഒരു നേർത്ത ജെൽ (സാധാരണയായി 1.0 എംഎം അല്ലെങ്കിൽ 1.5 എംഎം) ഒഴിച്ച് ഘടിപ്പിക്കുന്നു, അങ്ങനെ ജെല്ലിൻ്റെ അടിഭാഗം ഒരു അറയിൽ ബഫറിൽ മുങ്ങുകയും മുകൾഭാഗം ബഫറിൽ മുങ്ങുകയും ചെയ്യും. മറ്റൊരു അറയിൽ. കറൻ്റ് പ്രയോഗിക്കുമ്പോൾ, ചെറിയ അളവിലുള്ള ബഫർ മുകളിലെ അറയിൽ നിന്ന് താഴെയുള്ള അറയിലേക്ക് ജെല്ലിലൂടെ മൈഗ്രേറ്റ് ചെയ്യുന്നു. അസംബ്ലി നേരായ സ്ഥാനത്ത് തുടരുമെന്ന് ഉറപ്പുനൽകുന്ന ശക്തമായ ക്ലാമ്പുകൾ ഉപയോഗിച്ച്, ഉപകരണങ്ങൾ വേഗത്തിലുള്ള ജെൽ റണ്ണുകൾ സുഗമമാക്കുന്നു, അതിൻ്റെ ഫലമായി വ്യതിരിക്തമായ ബാൻഡുകൾ ഉണ്ടാകുന്നു.
Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltd. (Liuyi Biotechnology) പോളിഅക്രിലാമൈഡ് ജെൽ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് സെല്ലുകളുടെ (ടാങ്കുകൾ/ചേമ്പറുകൾ) വലിപ്പത്തിലുള്ള ഒരു ശ്രേണി നിർമ്മിക്കുന്നു. DYCZ-20C, DYCZ-20G എന്നീ മോഡലുകൾ ഡിഎൻഎ സീക്വൻസിംഗ് വിശകലനത്തിനുള്ള ലംബ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് സെല്ലുകളാണ് (ടാങ്കുകൾ/ചേമ്പറുകൾ). വെസ്റ്റേൺ ബ്ലോട്ടിംഗ് സിസ്റ്റം മോഡലായ DYCZ-40D, DYCZ-40G, DYCZ-40 മോഡലുകൾ DYCZ-24DN, DYCZ-25D, DYCZ-25E എന്നിവ പോലെ ചില ലംബ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് സെല്ലുകൾ (ടാങ്കുകൾ/ചേമ്പറുകൾ) ബ്ലോട്ടിംഗ് സിസ്റ്റവുമായി പൊരുത്തപ്പെടുന്നു. പ്രോട്ടീൻ തന്മാത്രയെ ജെല്ലിൽ നിന്ന് മെംബ്രണിലേക്ക് മാറ്റാൻ ഉപയോഗിക്കുന്നു. SDS-PAGE ഇലക്ട്രോഫോറെസിസിന് ശേഷം, ഒരു പ്രോട്ടീൻ മിശ്രിതത്തിൽ ഒരു പ്രത്യേക പ്രോട്ടീൻ കണ്ടെത്തുന്നതിനുള്ള ഒരു സാങ്കേതികതയാണ് വെസ്റ്റേൺ ബ്ലോട്ടിംഗ്. പരീക്ഷണാത്മക ആവശ്യകതകൾ അനുസരിച്ച് നിങ്ങൾക്ക് ഈ ബ്ലോട്ടിംഗ് സംവിധാനങ്ങൾ തിരഞ്ഞെടുക്കാം.
ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് പവർ സപ്ലൈ
ജെൽ പ്രവർത്തിപ്പിക്കുന്നതിന് വൈദ്യുതി നൽകുന്നതിന്, നിങ്ങൾക്ക് ഒരു ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് പവർ സപ്ലൈ ആവശ്യമാണ്. Liuyi ബയോടെക്നോളജിയിൽ ഞങ്ങൾ എല്ലാ ആപ്ലിക്കേഷനുകൾക്കുമായി ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് പവർ സപ്ലൈകളുടെ ഒരു ശ്രേണി നൽകുന്നു. ഉയർന്ന സ്ഥിരതയുള്ള വോൾട്ടേജും കറൻ്റും ഉള്ള മോഡൽ DYY-12, DYY-12C എന്നിവയ്ക്ക് ഉയർന്ന വോൾട്ടേജ് ആവശ്യകത ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് നിറവേറ്റാൻ കഴിയും. ഇതിന് സ്റ്റാൻഡ്, ടൈമിംഗ്, വിഎച്ച്, സ്റ്റെപ്പ്-ബൈ-സ്റ്റെപ്പ് ആപ്ലിക്കേഷൻ എന്നിവയുടെ പ്രവർത്തനമുണ്ട്. IEF, DNA സീക്വൻസിങ് ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് പ്രയോഗത്തിന് അവ അനുയോജ്യമാണ്. പൊതുവായ പ്രോട്ടീനും ഡിഎൻഎ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് ആപ്ലിക്കേഷനും, ഞങ്ങളുടെ പക്കൽ മോഡൽ DYY-2C, DYY-6C, DYY-10 എന്നിവയുണ്ട്, ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് സെല്ലുകൾ (ടാങ്കുകൾ/ചേമ്പറുകൾ) ഉള്ള ഹോട്ട് സെയിൽസ് പവർ സപ്ലൈസ് കൂടിയാണിത്. സ്കൂൾ ലാബ് ഉപയോഗം, ഹോസ്പിറ്റൽ ലാബ് തുടങ്ങിയ ഇടത്തരം, ലോ വോൾട്ടേജ് ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് ആപ്ലിക്കേഷനുകൾക്കായി ഇവ ഉപയോഗിക്കാം. വൈദ്യുതി വിതരണത്തിനുള്ള കൂടുതൽ മോഡലുകൾ, ദയവായി ഞങ്ങളുടെ വെബ്സൈറ്റ് സന്ദർശിക്കുക.
Liuyi ബ്രാൻഡിന് ചൈനയിൽ 50 വർഷത്തിലധികം ചരിത്രമുണ്ട്, കൂടാതെ കമ്പനിക്ക് ലോകമെമ്പാടും സുസ്ഥിരവും ഉയർന്ന നിലവാരമുള്ളതുമായ ഉൽപ്പന്നങ്ങൾ നൽകാൻ കഴിയും. വർഷങ്ങളുടെ വികസനത്തിലൂടെ, ഇത് നിങ്ങളുടെ തിരഞ്ഞെടുപ്പിന് യോഗ്യമാണ്!
ഞങ്ങളെക്കുറിച്ചുള്ള കൂടുതൽ വിവരങ്ങൾക്ക്, ഇമെയിൽ വഴി ഞങ്ങളെ ബന്ധപ്പെടുക[ഇമെയിൽ പരിരക്ഷിതം] or [ഇമെയിൽ പരിരക്ഷിതം].
എന്താണ് പോളിഅക്രിലാമൈഡ് ജെൽ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് എന്നതിനുള്ള റഫറൻസുകൾ?
1. കാരെൻ സ്റ്റുവാർഡ് പിഎച്ച്ഡി പോളിഅക്രിലാമൈഡ് ജെൽ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ്, ഇത് എങ്ങനെ പ്രവർത്തിക്കുന്നു, സാങ്കേതിക വകഭേദങ്ങൾ, അതിൻ്റെ പ്രയോഗങ്ങൾ
പോസ്റ്റ് സമയം: മെയ്-23-2022