സെല്ലുലോസ് അസറ്റേറ്റ് മെംബ്രൻ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് ഉപയോഗിക്കുന്നതിന് ഞങ്ങൾ കഴിഞ്ഞ ആഴ്ച നിരവധി പരിഗണനകൾ പങ്കിട്ടു, നിങ്ങളുടെ റഫറൻസിനായി ഞങ്ങൾ ഈ വിഷയം ഇന്ന് ഇവിടെ പൂർത്തിയാക്കും.
ന്റെ തിരഞ്ഞെടുപ്പ് ബഫർ ഏകാഗ്രത
സെല്ലുലോസ് അസറ്റേറ്റ് മെംബ്രൻ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസിൽ ഉപയോഗിക്കുന്ന ബഫർ സാന്ദ്രത പേപ്പർ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസിൽ ഉപയോഗിക്കുന്നതിനേക്കാൾ കുറവാണ്.സാധാരണയായി ഉപയോഗിക്കുന്ന pH 8.6Bആർബിറ്റൽ ബഫർ സാധാരണയായി 0.05 mol/L മുതൽ 0.09 mol/L വരെയുള്ള പരിധിക്കുള്ളിലാണ് തിരഞ്ഞെടുക്കുന്നത്.ഏകാഗ്രത തിരഞ്ഞെടുക്കുമ്പോൾ, ഒരു പ്രാഥമിക നിർണ്ണയം നടത്തുന്നു.ഉദാഹരണത്തിന്, ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് ചേമ്പറിലെ ഇലക്ട്രോഡുകൾക്കിടയിലുള്ള മെംബ്രൻ സ്ട്രിപ്പിന്റെ നീളം 8-10 സെന്റീമീറ്റർ ആണെങ്കിൽ, മെംബ്രൺ നീളത്തിന്റെ ഒരു സെന്റീമീറ്ററിന് 25V വോൾട്ടേജ് ആവശ്യമാണ്, നിലവിലെ തീവ്രത മെംബ്രൺ വീതിയുടെ സെന്റീമീറ്ററിന് 0.4-0.5 mA ആയിരിക്കണം.ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് സമയത്ത് ഈ മൂല്യങ്ങൾ കൈവരിക്കുകയോ കവിയുകയോ ചെയ്തില്ലെങ്കിൽ, ബഫർ സാന്ദ്രത വർദ്ധിപ്പിക്കുകയോ നേർപ്പിക്കുകയോ ചെയ്യണം.
അമിതമായി കുറഞ്ഞ ബഫർ കോൺസൺട്രേഷൻ ബാൻഡുകളുടെ ദ്രുത ചലനത്തിനും ബാൻഡ് വീതിയിൽ വർദ്ധനവിനും കാരണമാകും.മറുവശത്ത്, അമിതമായ ഉയർന്ന ബഫർ കോൺസൺട്രേഷൻ ബാൻഡ് മൈഗ്രേഷനെ മന്ദഗതിയിലാക്കും, ഇത് ചില സെപ്പറേഷൻ ബാൻഡുകളെ വേർതിരിച്ചറിയാൻ പ്രയാസമാക്കുന്നു.
സെല്ലുലോസ് അസറ്റേറ്റ് മെംബ്രൺ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസിൽ, വൈദ്യുതധാരയുടെ ഒരു പ്രധാന ഭാഗം സാമ്പിളിലൂടെ നടത്തപ്പെടുന്നു, ഇത് ഗണ്യമായ അളവിൽ താപം സൃഷ്ടിക്കുന്നു.ചിലപ്പോൾ, തിരഞ്ഞെടുത്ത ബഫർ കോൺസൺട്രേഷൻ ഉചിതമായി കണക്കാക്കാം.എന്നിരുന്നാലും, വർദ്ധിച്ച പാരിസ്ഥിതിക ഊഷ്മാവ് അല്ലെങ്കിൽ ഉയർന്ന വോൾട്ടേജ് ഉപയോഗിക്കുമ്പോൾ, ചൂട് മൂലമുള്ള ജലത്തിന്റെ ബാഷ്പീകരണം തീവ്രമാകാം, ഇത് അമിതമായ ഉയർന്ന ബഫർ സാന്ദ്രതയ്ക്ക് കാരണമാകുകയും മെംബ്രൺ വരണ്ടതാക്കുകയും ചെയ്യുന്നു.
സാമ്പിൾ വോളിയം
സെല്ലുലോസ് അസറ്റേറ്റ് മെംബ്രൻ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസിൽ, ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് അവസ്ഥകൾ, സാമ്പിളിന്റെ തന്നെ ഗുണങ്ങൾ, സ്റ്റെയിനിംഗ് രീതികൾ, കണ്ടെത്തൽ സാങ്കേതികതകൾ എന്നിവ ഉൾപ്പെടെ വിവിധ ഘടകങ്ങളാൽ സാമ്പിൾ വോളിയത്തിന്റെ അളവ് നിർണ്ണയിക്കപ്പെടുന്നു.ഒരു പൊതു തത്വമെന്ന നിലയിൽ, കൂടുതൽ സെൻസിറ്റീവ് ഡിറ്റക്ഷൻ രീതി, സാമ്പിൾ വോളിയം ചെറുതായിരിക്കും, ഇത് വേർതിരിക്കുന്നതിന് പ്രയോജനകരമാണ്.സാമ്പിൾ വോളിയം അമിതമാണെങ്കിൽ, ഇലക്ട്രോഫോറെറ്റിക് വേർതിരിക്കൽ പാറ്റേണുകൾ വ്യക്തമാകണമെന്നില്ല, കൂടാതെ സ്റ്റെയിനിംഗും സമയമെടുക്കും.എന്നിരുന്നാലും, എല്യൂഷൻ കളർമെട്രിക് കണ്ടെത്തൽ രീതികൾ ഉപയോഗിച്ച് വേർതിരിച്ച സ്റ്റെയിൻഡ് ബാൻഡുകളെ അളവ്പരമായി വിശകലനം ചെയ്യുമ്പോൾ, സാമ്പിൾ വോളിയം വളരെ ചെറുതായിരിക്കരുത്, കാരണം ഇത് ചില ഘടകങ്ങൾക്ക് കുറഞ്ഞ ആഗിരണം മൂല്യങ്ങൾക്ക് കാരണമാകും, ഇത് അവയുടെ ഉള്ളടക്കം കണക്കാക്കുന്നതിൽ ഉയർന്ന പിശകുകളിലേക്ക് നയിക്കുന്നു.അത്തരം സന്ദർഭങ്ങളിൽ, സാമ്പിൾ വോളിയം ഉചിതമായി വർദ്ധിപ്പിക്കണം.
സാധാരണഗതിയിൽ, സാമ്പിൾ ആപ്ലിക്കേഷൻ ലൈനിന്റെ ഓരോ സെന്റീമീറ്ററിലും ചേർക്കുന്ന സാമ്പിൾ വോളിയം 0.1 മുതൽ 5 μL വരെയാണ്, ഇത് 5 മുതൽ 1000 μg വരെ സാമ്പിൾ തുകയ്ക്ക് തുല്യമാണ്.ഉദാഹരണത്തിന്, സാധാരണ സെറം പ്രോട്ടീൻ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് വിശകലനത്തിൽ, ആപ്ലിക്കേഷൻ ലൈനിന്റെ ഓരോ സെന്റീമീറ്ററിലും ചേർത്ത സാമ്പിൾ വോളിയം സാധാരണയായി 1 μL കവിയരുത്, ഇത് 60 മുതൽ 80 μg വരെ പ്രോട്ടീന് തുല്യമാണ്.എന്നിരുന്നാലും, അതേ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് രീതി ഉപയോഗിച്ച് ലിപ്പോപ്രോട്ടീനുകളോ ഗ്ലൈക്കോപ്രോട്ടീനുകളോ വിശകലനം ചെയ്യുമ്പോൾ, സാമ്പിൾ വോളിയം അതിനനുസരിച്ച് വർദ്ധിപ്പിക്കേണ്ടതുണ്ട്.
ഉപസംഹാരമായി, പ്രാഥമിക പരീക്ഷണങ്ങളുടെ ഒരു പരമ്പരയിലൂടെ നിർദ്ദിഷ്ട വ്യവസ്ഥകളെ അടിസ്ഥാനമാക്കി ഏറ്റവും അനുയോജ്യമായ സാമ്പിൾ വോളിയം തിരഞ്ഞെടുക്കണം.
സ്റ്റെയിനിംഗ് സൊല്യൂഷന്റെ തിരഞ്ഞെടുപ്പ്
സെല്ലുലോസ് അസറ്റേറ്റ് മെംബ്രെൻ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസിലെ വേർതിരിച്ച ബാൻഡുകൾ സാധാരണയായി കണ്ടുപിടിക്കുന്നതിന് മുമ്പ് കറപിടിച്ചിരിക്കുന്നു.വ്യത്യസ്ത സാമ്പിൾ ഘടകങ്ങൾക്ക് വ്യത്യസ്ത സ്റ്റെയിനിംഗ് രീതികൾ ആവശ്യമാണ്, കൂടാതെ സെല്ലുലോസ് അസറ്റേറ്റ് മെംബ്രൺ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസിന് അനുയോജ്യമായ സ്റ്റെയിനിംഗ് രീതികൾ ഫിൽട്ടർ പേപ്പറിന് പൂർണ്ണമായും ബാധകമായേക്കില്ല.
സ്റ്റെയിനിംഗ് പരിഹാരം തിരഞ്ഞെടുക്കുന്നതിന് മൂന്ന് പ്രധാന തത്വങ്ങളുണ്ട്സെല്ലുലോസ് അസറ്റേറ്റ് മെംബ്രൺ.ഒന്നാമതായി,ആൽക്കഹോൾ-ലയിക്കുന്ന ചായങ്ങളേക്കാൾ വെള്ളത്തിൽ ലയിക്കുന്ന ചായങ്ങൾ തിരഞ്ഞെടുക്കണം, മെംബ്രൺ ചുരുങ്ങലും അവയിലെ സ്റ്റെയിനിംഗ് ലായനി മൂലമുണ്ടാകുന്ന രൂപഭേദവും ഒഴിവാക്കണം.സ്റ്റെയിനിംഗിന് ശേഷം, മെംബ്രൺ വെള്ളത്തിൽ കഴുകുകയും സ്റ്റെയിനിംഗ് ദൈർഘ്യം കുറയ്ക്കുകയും ചെയ്യേണ്ടത് പ്രധാനമാണ്.അല്ലാത്തപക്ഷം, മെംബ്രൺ ചുരുളുകയോ ചുരുങ്ങുകയോ ചെയ്തേക്കാം, ഇത് തുടർന്നുള്ള കണ്ടെത്തലിനെ ബാധിക്കും.
രണ്ടാമതായി, സാമ്പിളിന് ശക്തമായ സ്റ്റെയിനിംഗ് അടുപ്പമുള്ള ചായങ്ങൾ തിരഞ്ഞെടുക്കുന്നതാണ് നല്ലത്.സെറം പ്രോട്ടീനുകളുടെ സെല്ലുലോസ് അസറ്റേറ്റ് മെംബ്രൻ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസിൽ, അമിനോ ബ്ലാക്ക് 10B സാധാരണയായി ഉപയോഗിക്കാറുണ്ട്, കാരണം വിവിധ സെറം പ്രോട്ടീൻ ഘടകങ്ങളോടും അതിന്റെ സ്ഥിരതയോടുമുള്ള ശക്തമായ സ്റ്റെയിനിംഗ് അടുപ്പം കാരണം.
മൂന്നാമതായി, വിശ്വസനീയമായ ഗുണനിലവാരമുള്ള ചായങ്ങൾ തിരഞ്ഞെടുക്കണം.ചില ചായങ്ങളിൽ, ഒരേ പേരുണ്ടെങ്കിലും, കറയ്ക്ക് ശേഷം പ്രത്യേകിച്ച് ഇരുണ്ട പശ്ചാത്തലത്തിൽ ഉണ്ടാകുന്ന മാലിന്യങ്ങൾ അടങ്ങിയിരിക്കാം.ഇത് യഥാർത്ഥത്തിൽ നന്നായി വേർപെടുത്തിയ ബാൻഡുകളെ മങ്ങിക്കുകയും, അവയെ വേർതിരിച്ചറിയാൻ പ്രയാസമാക്കുകയും ചെയ്യും.
അവസാനമായി, സ്റ്റെയിനിംഗ് ലായനി കോൺസൺട്രേഷൻ തിരഞ്ഞെടുക്കുന്നത് പ്രധാനമാണ്.സൈദ്ധാന്തികമായി, ഉയർന്ന സ്റ്റെയിനിംഗ് ലായനി കോൺസൺട്രേഷൻ സാമ്പിൾ ഘടകങ്ങളുടെ കൂടുതൽ സമഗ്രമായ സ്റ്റെയിനിംഗിലേക്കും മികച്ച സ്റ്റെയിനിംഗ് ഫലങ്ങളിലേക്കും നയിക്കുമെന്ന് തോന്നിയേക്കാം.എന്നിരുന്നാലും, ഇത് അങ്ങനെയല്ല.സാമ്പിൾ ഘടകങ്ങളും ഡൈയും തമ്മിലുള്ള ബൈൻഡിംഗ് അഫിനിറ്റിക്ക് ഒരു നിശ്ചിത പരിധിയുണ്ട്, ഇത് സ്റ്റെയിനിംഗ് ലായനിയുടെ സാന്ദ്രത വർദ്ധിക്കുന്നതിനനുസരിച്ച് വർദ്ധിക്കുന്നില്ല.നേരെമറിച്ച്, അമിതമായ ഉയർന്ന സ്റ്റെയിനിംഗ് ലായനി കോൺസൺട്രേഷൻ ചായം പാഴാക്കുക മാത്രമല്ല, വ്യക്തമായ പശ്ചാത്തലം നേടുന്നത് ബുദ്ധിമുട്ടാക്കുകയും ചെയ്യുന്നു.മാത്രമല്ല, വർണ്ണ തീവ്രത ഒരു നിശ്ചിത പരമാവധി മൂല്യത്തിൽ എത്തുമ്പോൾ, ഡൈയുടെ ആഗിരണം വക്രം ഒരു രേഖീയ ബന്ധത്തെ പിന്തുടരുന്നില്ല, പ്രത്യേകിച്ച് അളവ് അളവുകളിൽ. സെല്ലുലോസ് അസറ്റേറ്റ് മെംബ്രൺ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസിൽ, സ്റ്റെയിനിംഗ് ലായനി സാന്ദ്രത പേപ്പർ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസിൽ ഉപയോഗിക്കുന്നതിനേക്കാൾ കുറവാണ്.
Beijing Liuyi ബയോടെക്നോളജിയെക്കുറിച്ച് അറിയാനുള്ള വിശദാംശങ്ങൾ's സെല്ലുലോസ് അസറ്റേറ്റ് മെംബ്രൺഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് ടാങ്കും അതിന്റെ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ് ആപ്ലിക്കേഷനും ദയവായി ഇവിടെ സന്ദർശിക്കുക:
എൽസെല്ലുലോസ് അസറ്റേറ്റ് മെംബ്രൺ ഉപയോഗിച്ച് സെറം പ്രോട്ടീൻ വേർതിരിക്കുന്നതിനുള്ള പരീക്ഷണം
എൽസെല്ലുലോസ് അസറ്റേറ്റ് മെംബ്രൻ ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ്
ഞങ്ങളുടെ ഉൽപ്പന്നങ്ങൾക്കായി നിങ്ങൾക്ക് എന്തെങ്കിലും വാങ്ങൽ പ്ലാൻ ഉണ്ടെങ്കിൽ, ഞങ്ങളെ ബന്ധപ്പെടാൻ മടിക്കരുത്.നിങ്ങൾക്ക് ഇമെയിൽ വഴി ഞങ്ങൾക്ക് സന്ദേശം അയക്കാം[ഇമെയിൽ പരിരക്ഷിതം]അഥവാ[ഇമെയിൽ പരിരക്ഷിതം], അല്ലെങ്കിൽ ദയവായി ഞങ്ങളെ +86 15810650221 എന്ന നമ്പറിൽ വിളിക്കുക അല്ലെങ്കിൽ Whatsapp +86 15810650221 ചേർക്കുക, അല്ലെങ്കിൽ Wechat: 15810650221.
റഫറൻസ്:ഇലക്ട്രോഫോറെസിസ്(രണ്ടാം പതിപ്പ്) ശ്രീ. ലി
പോസ്റ്റ് സമയം: ജൂൺ-06-2023